ラリー・デイリー（ベン・スティラー演じる）は不安定な生活を送っているようだ。彼は頻繁に転職し、定住地を持たず、妻は離婚して証券ブローカーを見つけ、息子の目には再婚を控えている。危険も伴います。命を救い、息子の親権を得るために、ダリは「何か大きなことをする」という夢を諦めなければならず、ニューヨーク自然史博物館の夜間警備員になった。ダリは最初は退屈な仕事だと思っていましたが、仕事の初日に信じられないことが起こりました。博物館のファラオの金メダルには魔法の力があり、夜になると博物館のすべての標本が生き返ります。骨を追いかけるティラノサウルス、トラブルメーカーのサル、横暴なフン族、木を掘って火を起こす穴居人…すべてが台無しになるでしょう。第 26 代大統領テディ・ルーズベルトの援助により、ダリは最終的に状況を制御しましたが、すぐに新たな問題に遭遇しました。ファラオの金メダルを狙う者がいたということです。ダリは自分の義務のため、そして夜の美術館の奇跡のために前に出なければなりませんでした。